康宁杰瑞JSKN027(AK112的PLUS版本)之五:PD-L1和VEGFR2双抗的机制说明
$康宁杰瑞制药-B(09966)$ $康方生物(09926)$ 转发一篇公众号的文章，说明“双靶点纳米抗体新突破！同时阻断PD-L1与VEGFR2，激活长效抗癌免疫+抑制转移”，过去的文章都写的不够详细，这个文章写得非常详细，大家可以参考这个文章，对于理解康宁杰瑞的JSKN027的PD-L1和VEGFR2双靶点ADC更有帮助，而康方生物的AK112的靶点是PD-1和VEGF，一个是作用在免疫细胞，一个作用在抗血管的因子，康方生物和康宁杰瑞的作用的方向不一样，康方是一个配体，而康宁是受体。因为是作用于肿瘤的受体上，所以康宁杰瑞在这个文章提到的双抗基础上，又进一步进行了升级做成了双抗ADC，加上了毒素拓扑异构酶抑制剂Dxd的细胞毒性的化疗功能，这样就具有细胞毒杀伤+抗血管生成+免疫调节三个功能了,可以说是结合了三个功能的IO2.0+ADC2.0的一步到位功能。
2026年3月17日，中国苏州，康宁杰瑞生物制药（股票代码：9966.HK）宣布，公司自主研发的PD-L1/VEGFR2双特异性抗体偶联药物（ADC）JSKN027治疗晚期恶性实体瘤的Ⅰ期临床研究（研究编号：JSKN027-101）已完成首例患者给药，经过7-8个月剂量爬坡，可能在年底就会看见027的初步数据了。
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文章具体内容：癌症治疗的两大核心难题——免疫逃逸与远处转移，长期制约着临床疗效。PD-L1介导的免疫检查点通路会让肿瘤细胞“隐身”躲避T细胞攻击，而VEGFR2信号通路则驱动肿瘤血管生成与转移扩散，两者协同促进癌症进展。传统单一疗法难以同时破解这两大困境，且易引发免疫相关副作用或脱靶效应。
近期，《Molecular Cancer》发表的一项创新性研究，成功开发出PD-L1/VEGFR2双特异性纳米抗体FAP1V2，通过胞内瞬时表达技术，实现“免疫激活+抗转移”双重功效，在肺癌模型中展现出显著的肿瘤抑制效果，甚至诱导长效免疫记忆，为癌症联合治疗提供了全新思路。
一、核心设计：双靶点纳米抗体的“精准打击”逻辑
研究团队摒弃传统抗体的Fc片段与轻链可变区（VL），仅保留重链可变区（VH），构建出超小型双特异性胞内抗体FAP1V2，其设计亮点兼具特异性与实用性：
•双靶点协同：一端靶向PD-L1，阻断PD-1/PD-L1免疫抑制通路；另一端靶向VEGFR2，抑制肿瘤血管生成与细胞迁移，同时解决免疫逃逸与转移两大痛点；
•结构优化：通过柔性连接肽（GGGGS）串联抗PD-L1 VH（FAP1）与抗VEGFR2 VH（FAV2），中间融合EGFP作为示踪标记，N端添加IL-2信号肽、C端连接GPI锚定序列，确保抗体在细胞内精准定位并发挥作用；
•低免疫原性：仅含VH结构域，分子量小且无外源异源片段，生物相容性高，避免传统抗体引发的免疫相关不良反应。
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图1：FAP1V2双特异性纳米抗体结构与作用机制
：A图为FAP1V2分子结构示意图，展示IL-2信号肽、抗PD-L1 VH、EGFP、抗VEGFR2 VH及GPI锚定序列的串联模式；B图为3D模型，橙色区域为抗PD-L1结构域，深蓝色为抗VEGFR2结构域，绿色为EGFP，呈现“夹子状”结合构象，可同时识别两个靶点的不同表位。
二、核心功能：三重功效，重塑抗癌防线
FAP1V2通过精准靶向PD-L1与VEGFR2，在体外与体内实验中均展现出“阻断通路+激活免疫+抑制转移”的三重核心功效：
1. 特异性阻断双靶点，抑制肿瘤细胞功能
•PD-L1阻断：FAP1V2可与细胞表面及胞内PD-L1结合，占据其与PD-1的结合位点，显著降低PD-L1与PD-1的相互作用，解除免疫抑制；
•VEGFR2阻断：特异性结合VEGFR2，抑制其下游AKT、ERK等信号通路激活，减少肿瘤细胞迁移能力，体外划痕实验显示，FAP1V2表达组细胞迁移距离较对照组减少50%以上；
•特异性验证：免疫共沉淀与竞争结合实验证实，FAP1V2仅与PD-L1、VEGFR2结合，不与其他细胞因子交叉反应，靶点特异性强。
2. 激活长效T细胞免疫，避免T细胞耗竭
在LLC肺癌小鼠模型中，FAP1V2胞内瞬时表达展现出强效免疫激活效果：
•肿瘤组织中高表达TCRβ的活化T细胞（TCRβhi）浸润显著增加，这类细胞是特异性杀伤肿瘤细胞的核心力量；
•脾脏中CD25hi活化T细胞比例升高2.2倍，CD25是T细胞激活的关键标志物，提示全身免疫应答被有效唤醒；
•肿瘤微环境中PD-1高表达（PD-1hi）的耗竭型免疫细胞数量大幅减少，避免T细胞功能衰竭，维持长期抗癌活性。
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图2：FAP1V2对T细胞活化的调控作用
：左图为免疫荧光结果，黄色箭头指示肿瘤组织中TCRβhi T细胞（绿色荧光）浸润，红色箭头指示PD-1hi免疫细胞（红色荧光），FAP1V2组绿色荧光显著多于对照组，红色荧光明显减少；右图为流式分析结果，显示FAP1V2组脾脏CD25hi T细胞比例显著高于对照组，证实免疫激活效果。
3. 强效抑制肿瘤转移，降低远处扩散风险
•体外抑制迁移：HeLa与LLC细胞中表达FAP1V2后，迁移能力显著下降，且对细胞活力无明显影响，说明其通过抑制迁移通路发挥作用，而非直接杀伤细胞；
•体内抗转移验证：小鼠肺、肝组织免疫荧光分析显示，FAP1V2组未检测到明显的LLC肿瘤细胞转移灶，而对照组与单靶点抗体组均出现不同程度的转移，证实其阻断VEGFR2通路的抗转移功效。
三、体内疗效：肿瘤抑制+免疫记忆，双重保障
在C57BL/6小鼠LLC肺癌模型中，FAP1V2的治疗效果显著优于单靶点抗体（FAP1、FAV2）与对照组：
•肿瘤生长抑制：通过两次瞬时表达FAP1V2，小鼠原发肿瘤与二次接种肿瘤的生长均被显著抑制，1/6小鼠实现肿瘤完全消退；
•免疫记忆形成：对完全缓解的小鼠进行肿瘤细胞再挑战，90%的小鼠未出现肿瘤复发，表明FAP1V2诱导产生了长效抗原特异性免疫记忆，持续保护机体免受肿瘤侵袭；
•安全性优异：实验期间小鼠体重无明显下降，主要器官（心、肝、脾、肺、肾）的组织病理学分析未发现异常损伤，证实其生物安全性。
•图3：FAP1V2在小鼠模型中的肿瘤抑制效果：H图为肿瘤生长曲线，显示FAP1V2组肿瘤体积显著小于对照组、FAP1组与FAV2组；I图为实验终点剥离的肿瘤实物图，直观呈现FAP1V2对肿瘤生长的强效抑制作用，二次接种肿瘤的抑制效果更显著。
四、分子机制：转录组层面揭示核心调控通路
通过转录组测序分析，FAP1V2表达后，HeLa细胞中多个与肿瘤进展相关的通路发生显著变化：
•免疫相关基因：CD160（NK细胞激活因子）、FOXP3（免疫调节因子）等上调，增强免疫应答；
•迁移抑制基因：PCDHA6、UCN、MXRA8等上调，这些基因可抑制细胞黏附与迁移；MET、DDR2、PI16等促迁移基因下调，阻断肿瘤转移信号；
•关键通路调控：Wnt/β-catenin、PI3K/AKT等促癌通路被抑制，TGF-β1、NF-κB等炎症与免疫通路被激活，从转录层面重塑细胞功能，抑制肿瘤进展。
五、临床转化价值与展望
这项研究的创新之处，在于首次开发出PD-L1/VEGFR2双特异性胞内纳米抗体，为癌症联合治疗提供了全新技术路径，其核心转化价值体现在：
•治疗场景广泛：同时适用于实体瘤的原发灶控制与转移灶抑制，尤其对PD-L1与VEGFR2高表达的肺癌、宫颈癌等癌症具有针对性；
•联合治疗潜力：可与免疫检查点抑制剂、化疗药物或细胞治疗联合使用，进一步增强疗效，为难治性癌症提供个性化治疗方案；
•递送方式灵活：可通过质粒转染、纳米载体递送等方式实现胞内表达，未来可开发成基因治疗药物，精准靶向肿瘤细胞；
•低毒高效优势：生物相容性高、无明显副作用，解决传统联合疗法不良反应叠加的问题，提升患者耐受性。
目前，双特异性抗体已成为癌症免疫治疗的热门方向，但针对PD-L1与VEGFR2的胞内双特异性纳米抗体尚未进入临床。FAP1V2的成功研发，不仅验证了“免疫激活+抗转移”联合策略的可行性，更为纳米抗体在癌症治疗中的应用开辟了新场景。未来通过优化递送系统、提升体内表达稳定性，有望推动这类新型抗体进入临床，为癌症患者带来新的治疗选择。
文献参考
Zhang L, Lin Y, Hu L, et al. Transient intracellular expression of PD-L1 and VEGFR2 bispecific nanobody in cancer cells inspires long-term T cell activation and infiltration to combat tumor and inhibit cancer metastasis. Molecular Cancer. 2025;24:119.（DOI: 10.1186/s12943-025-02253-6）
参考文献下载链接：
网页链接{Transient intracellular expression of PD-L1 and VEGFR2 bispecific nanobody in cancer cells inspires long-term T cell activation and infiltration to combat tumor a.pdf}